探討elisa試劑盒的免疫沉淀技術

更新時間：2022-07-22

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　　elisa試劑盒具有特異性強，準確度高，檢查速度快等多方面的特點。在食品藥品監督管理局，進行食品檢查的時候，可是有效的快速的檢測出結果，看檢測食品是否符合要求。elisa試劑盒的檢測速度比國標法快速，且敏感性高、特異性強，結果分析簡單。

　　elisa試劑盒能便于滲透入組織細胞內，且未發現嚴重的物理吸附現象。在PPA實驗中稀釋液常用含0.5%（v/v）Tween20的0.02mol/L Ph 7.4 Tris-HC1緩沖液。用特殊的微孔板作為測定板，elisa試劑盒用親和素包被微孔板，然后用生物維生素標記探針的3端，再通過該生物維生素和包被在微孔板上的親和素發生連接，將探針固定在微孔板上，形成一個固相捕獲系統。

　　擴增時引物用抗原標記，這樣擴增產物中就會滲入抗原。

　　PCR擴增產物與微孔板上的探針雜交，從而捕獲被測靶序列，由于擴增產物中已經滲入抗原，在微孔中加入HRP標記抗體后，酶標抗體就與靶序列的抗原免疫結合，后加入酶底物進行酶促顯色，elisa試劑盒通過光密度測定實現定量。

　　PCR-ELISA比PCR本身在病毒分型，基因多態性分析與克隆鑒定等方面有其*的優勢。另外，不應用同位素標記，因而避免了放射性帶來的危害，而且整個實驗周期僅需6h左右，操作簡便，可用于大量標本的檢測。盡管與熒光素染色凝膠電泳相比較，PCR-ELISA檢測結果的特異性，靈敏性和準確性有顯著的提高，但是ELISA試劑盒基本上是一個開放性的反應系統，特別是在洗滌大鼠ELISA試劑盒反應板時，很容易造成污染，從而引起假陽性。因此，在PCR-ELISA整個實驗過程中，必須進行嚴格的無菌操作，同時，PCR-ELISA對PCR產物和探針的雜交條件要求嚴格。