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豬環曲病毒PCR檢測試劑盒規格

產品簡介

豬環曲病毒PCR檢測試劑盒規格
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CysLTs檢測試劑盒精密度elisa試劑一般指其批內cv%,其值應小于15%

更新時間:2021-03-13
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注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

 產品名稱

 豬環曲病毒PCR檢測試劑盒規格

 英文名稱

 Porcine Torovirus(PToV)RTPCR

 貨號

 LZP7176

實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
STPP2,7-二羥基萘 97%2,5-二氯苯 97%

Sodium metasilicate nahydrate7-甲氧基-2-萘滿酮 98%2-基苯酚 95%

Sodium stannate二(2-乙基己基)磷酸酯 95%1-甲基-3-硝基胍 98%(~25%water)

Sodium tungstate dihydrate二(2-乙基己基)磷酸酯 CP甲氨基乙縮二甲 97%

1-Naphthyl phsophoric acid sodium salt二(2-乙基己基)磷酸酯 95%3-氨基噻吩-2-羧酸甲酯 99%

2-Naphthyl phosphate sodium salt對苯醌 97%2-三氟甲酰氯 98%

Sodium bitartrate mohydrate對苯醌 99%鄰三氟甲酸 98%

Sodium formate對苯醌 用于光譜測定胺, ≥99.5% (HPLC)2-(三氟甲基)苯甲 98%

Sodium dodecaate鹽酸苯肼 99%2,4,6-三氯苯甲 97%

Sodium oleate苯肼 AR,98.0%帕莫酸 97%

Sodium stearate硫酸苯肼 CP,98.0%3-雙(2-羥乙基)氨基-2-羥基磺酸 98%

PAAS馬來酰肼 98%5,5'二硫代雙(2-甲酸) 98%

Sodium azide甲基三辛基氯化銨(R=C8-C10)  90%N-乙基-N-(2-羥基-3-磺基)-3-甲氧基苯胺鈉鹽 99%

ResorilN-丁基溴化吡啶 99%2-氯乙基磺酸鈉 98%

2-Amiphel芐基三丁基氯化銨 98%N-三(羥甲基)甲氨基-2-羥基磺酸 99%

3-Amiphel1-丁基吡啶鹽酸鹽 98%N-(3-磺基)-3,3',5,5'-四甲基聯苯胺鈉鹽 99%

精胺四鹽酸鹽;鹽酸精胺WDR5 (D9E1I) Rabbit mAbRabbit Anti-horse IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標記的兔抗馬IgG

D-熒光素鹽,D-蟲熒光素鹽Tyrosine Hydroxylase (A8Y7R) Rabbit mAbRabbit Anti-horse IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標記的兔抗馬IgG

鹽酸雷尼替丁p63-α (D2K8X) XP® Rabbit mAbRabbit Anti-horse IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標記的兔抗馬IgG

鹽酸雷尼替丁(標準品)p63-α (D2K8X) XP® Rabbit mAbRabbit Anti-horse IgG/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標記的兔抗馬IgG

熒光素鈉PCNA (D3H8P) XP® Rabbit mAbRabbit anti-horse IgG whole serum  兔抗馬IgG抗血清

D-蟲熒光素鈉鹽;D-熒光素鈉鹽PCNA (D3H8P) XP® Rabbit mAbRabbit Anti-horse IgG  兔抗馬IgG

2ˊ,7ˊ-二氯熒光素鈉鹽Phospho-CDCP1 (Tyr707) AntibodyRabbit Anti-Guinea pig IgM/RBITC  羅丹明標記的兔抗豚鼠IgM

天青I;天青BCD71 (D7G9X) XP® Rabbit mAbRabbit Anti-Guinea pig IgM/PE-Cy7  PE-Cy7標記的兔抗豚鼠IgM

天青IICD71 (D7G9X) XP® Rabbit mAbRabbit Anti-Guinea pig IgM/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標記的兔抗豚鼠IgM

天青AUVRAG (D2Q1Z) Rabbit mAbRabbit Anti-Guinea pig IgM/PE-CY5  PE-CY5標記的兔抗豚鼠IgM
豬環曲病毒PCR檢測試劑盒規格人套膜蛋白(iNV)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT10克

人特異性巨噬細胞武裝因子(SMAF)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:2~8℃1克

人天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:500克

人天門冬氨酸轉氨酶/谷草轉氨酶(GOT/GPT)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:300支/包

人天青殺素(AZU)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT10個

人鐵蛋白(FE)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

人同型半胱氨酸(Hcy)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:2~8℃25毫升

人銅藍蛋白(CP/CER)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT100克

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