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猴病毒PCR檢測試劑盒廠家

產品簡介

猴病毒PCR檢測試劑盒廠家
上海聯祖生物相關產品:
anti-HDV檢測試劑盒 計算:以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標, 在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋 倍數;

更新時間:2021-03-13
訪問次數:620
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注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

 產品名稱

 猴病毒PCR檢測試劑盒廠家

 英文名稱

 Simian Virus 40(SV40)40PCR

 貨號

 LZP7302

組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
ZingeroneFmoc-D-亮氨酸 BR黨參炔苷 分析標準品,≥98%

AsarylaldehydeFmoc-D-脯氨酸 BR甘草素 分析標準品,≥98%

1-(3,4-dimethoxyphenyl)-2-(4-allly-2,6-dimethoxyphexy)propan-1-olFmoc-D-纈氨酸 98%蒿本內酯 分析標準品,≥90%

1-(3,4-Dimethoxyphenyl)propane-1,2-diolFmoc-D-絲氨酸 BR烏藥內脂 分析標準品,≥98%

1,4-Dicaffeoylquinic acid甘氨酸-L-亮氨酸 98%鹽酸川芎 分析標準品,≥98%(HPLC)

1-(4-Hydroxyphenyl)propan-1-oneDL-谷氨酸 98%α-倒捻子素 分析標準品,≥98%

1-Caffeoylquinic acidL-谷氨酸雙芐酯對甲苯磺酸鹽 98%羅漢果苷V  分析標準品,≥98%

2,3,4’-Trihydroxy-3’,5’-dimethoxypropiopheneD-哌啶酸  99%(-)-薄荷 分析標準品,≥99.5%

2,3-dihydroxy-3-(4-hydroxyphenyl)propaic acidL-高精氨酸鹽酸鹽 98%烏金甙 分析標準品,≥98%

2-Chlorocinnamic acidDL-高絲氨酸 99%新橙皮苷 分析標準品,≥97%

2-Ethylhexyl trans-4-methoxycinnamateL-高絲氨酸 98%荷葉堿 分析標準品

2-Hydroxycinnamic acidFmoc-L-羥脯氨酸 98%異甘草苷 分析標準品,≥98%

2-Methoxycinnamic acid磷酸組胺 99%諾米林 分析標準品,≥98%

3-(2,4-Dihydroxyphenyl)propionic acidL-高苯氨酸 98%蕓香柚皮苷 分析標準品,≥98%

3-(2-Hydroxyphenyl)-2-propenal組胺 98%桔梗皂苷D 分析標準品,≥98%

3,4,5-Tricaffeoylquinic acidL-羥脯氨酸甲酯鹽酸鹽 98%松酯二葡萄糖苷 分析標準品,>98%

丁胺卡那霉素無RhoA (67B9) Rabbit mAbphospho-IRS1(Ser302)  磷酸化胰島素受體底物-1抗體

氨茶堿(>98%,BR)GAPDH (14C10) Rabbit mAbphospho-IRS1(Ser1101)  磷酸化胰島素受體底物-1抗體

酸銨三(>99%,BR)GAPDH (14C10) Rabbit mAbPhospho-IRF7 (Ser471/472)  磷酸化干擾素調節因子7抗體

檸檬酸鉍銨BRF1/2 Antibodyphospho-IRF3(Ser386)  磷酸化干擾素調節因子3抗體

硫酸氫銨(>98%,BR)FABP4 AntibodyPhospho-IRF3 (Ser396)  磷酸化干擾素調節因子3

溴化銨(>99%,BR)Cleaved α-Fodrin (Asp1185) Antibodyphospho-IRAK4(Thr345)  磷酸化白介素-1受體相關激酶4抗體

氟酸銨(>98%,BR)Alpha-Fodrin AntibodyPhospho-IRAK1 (Thr387)  磷酸化白介素-1受體相關激酶1抗體

氟化氫銨(>98%,BR)Src (32G6) Rabbit mAbPhospho-IRAK1 (Thr209)  磷酸化白介素-1受體相關激酶1抗體

化銨(>99%,BR)Src (32G6) Rabbit mAbPhospho-IRAK1 (Ser376)  磷酸化白介素-1受體相關激酶1抗體

十二合硫酸鐵銨(>98%,BR)α-Tubulin (11H10) Rabbit mAbPhospho-Insulin Receptor Beta(Tyr1361)  磷酸化胰島素受體β抗體
猴病毒PCR檢測試劑盒廠家小鼠少突膠質細胞髓鞘糖蛋白抗體(OMgp-Ab)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:1公斤

小鼠神經膠質纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT5克

小鼠神經生長因子(NGF)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

小鼠神經絲蛋白(NF)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:25克

小鼠神經肽Y(NP-Y)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

小鼠神經營養因子3(NT-3)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT10克

小鼠神經營養因子4(NT-4)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT1克

小鼠腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:25克
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

 

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