LAM脂阿拉伯甘露聚糖ELISA試劑盒

產(chǎn)品屬性：

需要而未提供的試劑和器材：

1. 產(chǎn)品僅用于科研標準規(guī)格酶標儀

2. 高速離心機

3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱

4. 干凈的試管和Eppendof管

5. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭，一次檢測樣品較多時，用多通道移液器

6. 蒸餾水，容量瓶等。

標本要求：

1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。

2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

備試劑與收集血樣：

1.  收集標本：血清、血漿（EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測， 2-8 ℃ 保存48 小時；更長時間須冷凍（ -20   ℃或 -70   ℃ ）保存，避免反復凍融。

2.  標準品液配制：使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標準 管 8 管，管加標本稀釋液 900ul ，第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ，移至第二管 。如此反復作對倍稀釋，從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。

3.  10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋（ 示例： 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水）。

4.  洗滌液：用重蒸水 1:20 稀釋（示例：1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水）

檢測程序：

1.  加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ，將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

樣本實驗前準備：

ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。

（1）血清

室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

（2）血漿：

應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

（3）尿液：

用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。

（4）細胞培養(yǎng)上清：

檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。

（5）培養(yǎng)細胞

檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

（6）組織標本

切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

組蛋白H2b(histon-H2b)試劑盒25-氧澤瀉A2,6-二氟苯酰  97%鈉 CP

組蛋白H2b(histon-H2b)試劑盒25-羥原參二  98%鈉 ACS，99.0-101.0%

骨保護素(OPG)試劑盒 25-脫水澤瀉A;澤瀉G氟化，無水 AR，粉末鉑銨 AR

骨保護素(OPG)試劑盒 27-羥膽固氟化，無水 GR，粉末亞鉑銨 鉑含量：52.0%

骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)試劑盒28-去-β-香樹脂氟化，無水 SP亞鈀銨 Pd ≥36.5%

骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)試劑盒2-O-alpha-L-鼠李吡喃糖甙鳶尾酚氟化，無水 99.9% metals basis銥銨 銥含量：43.0%

骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)試劑盒2''-O-p-反式香豆酰葒草氟化，無水 AR，顆粒氧化金 金含量≥88.6 %

骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)試劑盒2''-O-p-香豆酰氟化，無水 電子級，粉末反式-雙(三苯膦)合化羰銠(Ⅰ) Rh 14.91%

骨成型蛋白4(BMP-4)試劑盒2-O-乙酰山椒子烯13-乙酰-9-羥巴卡丁III 分析標準品，≥99%雙(苯)二鉑(II) Pt ≥41.0%

骨成型蛋白4(BMP-4)試劑盒2-烯丁內(nèi)酯13-乙酰-9-羥巴卡丁III 99%二二氨鈀 Pd ≥50%

骨成型蛋白2(BMP-2)試劑盒2-金剛烷10-脫乙酰巴卡丁 III 95%銥 Ir 35% in HCl

骨成型蛋白2(BMP-2)試劑盒2-金剛烷7-乙-10-羥喜樹 98%二氧化銥 Ir 86%

環(huán)磷腺(cAMP)試劑盒2-乙酰洋鬼臼素 98%銥粉 99.99% metals basis

環(huán)磷腺(cAMP)試劑盒3,6′-二芥子酰蔗糖紫杉 分析標準品，≥98% 銥粉 99.9% metals basis

甘露聚糖結(jié)合凝集素相關(guān)絲氨蛋白(MASP)試劑盒3,29-二苯酰栝樓仁三紫杉 98%三化銥  試劑級,Ir>52%

甘露聚糖結(jié)合凝集素相關(guān)絲氨蛋白(MASP)試劑盒3,3',4',5-四氧二苯乙烯乙脒 99%四化銥(IV) 水合物 Ir 48.0 - 55.0 %
LAM脂阿拉伯甘露聚糖ELISA試劑盒是一種天然染料，是組胚，病理，泌尿，婦產(chǎn)科及各實驗室中常用的染色劑，主要用于細胞核染色。帶正電荷的堿性染料與細胞核中帶負電荷的性物質(zhì)結(jié)合使細胞核染成藍色。

操作步驟

1. 將樣本涂于清潔的玻片上，制成薄涂片

2. 將涂片放于95%乙醇固定5-6 分鐘，然后置空氣中晾干。

3. 滴加染液6-8 滴蓋滿樣本，染色5-8 分鐘，流水洗去多余染液。即可鏡下觀察。此片一般可保存半年以上。若想多年長期保存可進行4 和5 步操作。

4. 依次置入兩個無水乙醇缸中脫水，每缸1 分鐘。

5. 再移入二甲苯缸中，透明1 分鐘，中性樹脂封片，鏡檢。

染色結(jié)果：鏡檢結(jié)果：胞核呈藍紫色。

注意：染色太淺可重復步驟3，復染。染色太深可用0.1%鹽-酒精脫色。

儲存：室溫，有效期一年。

操作步驟：

1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。

5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7.溫育：操作同3。

8.洗滌：操作同5。

9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘。

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。