注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響，但為取得良好的使用效果，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存，并適當注意避免反復凍融。
     如果有細菌或真菌污染，會嚴重影響檢測效果。
     染色后宜盡快檢測，時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶，需注意設法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC，導致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進行熒光觀察時，盡量縮短觀察時間，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細胞儀檢測時，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞，并且通過調(diào)整相關設置和參數(shù)也無法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測，這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細胞。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
產(chǎn)品名稱：小鼠小腸上皮細胞系
英文簡稱：MODE-K 細胞

貨號：LZ-X969678
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部分產(chǎn)品現(xiàn)貨，公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價，產(chǎn)品貨期短，價格優(yōu)，售后齊全。

凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C。或者，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
   2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
   5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
   6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。
實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 
5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 
6、細胞計數(shù)板1塊； 
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 
8、酒精燈1臺；

花生四烯酸阿米卡星藥敏實驗紙片（擴散法） AK 30ug TNF ALPHA蛋白表達熒光定量檢測試劑盒

華蟾它靈頭孢西丁藥敏實驗紙片（擴散法） FOX 30ug TNF BETA蛋白表達比色法定量檢測試劑盒

華蟾酥基頭孢呋新鈉藥敏實驗紙片（擴散法） CXM 30ug TNF BETA蛋白表達流式儀檢測試劑盒

槐定堿 苯唑西林藥敏實驗紙片（擴散法） OX 1ug TNF BETA蛋白表達熒光定量檢測試劑盒

槐果堿阿莫西林 AmL 10ug TRAIL 蛋白表達比色法定量檢測試劑盒

槐角苷頭孢噻肟藥敏實驗紙片（擴散法） CTX 30ug TRAIL 蛋白表達流式儀檢測試劑盒

還原型谷胱甘肽磷霉素 FOS 50ug TRAIL 蛋白表達熒光定量檢測試劑盒

環(huán)巴哌拉西林藥敏實驗紙片（擴散法） PRL 100ug TSH-BETA蛋白表達比色法定量檢測試劑盒

環(huán)黃芪利福平 RD 5ug TSH-BETA蛋白表達流式儀檢測試劑盒

環(huán)氧前胡阿莫西林-棒酸（澳格門丁） AMC 30ug TSH-BETA蛋白表達熒光定量檢測試劑盒

環(huán)氧續(xù)隨子頭孢哌酮藥敏實驗紙片（擴散法） CFP 75ug TUBULIN蛋白表達比色法定量檢測試劑盒

環(huán)氧澤瀉烯氨曲南藥敏實驗紙片（擴散法） ATM 30ug TUBULIN蛋白表達流式儀檢測試劑盒

黃柏堿頭孢他啶藥敏實驗紙片（擴散法） CAZ 30ug TUBULIN蛋白表達熒光定量檢測試劑盒

黃柏酮頭孢曲松藥敏實驗紙片（擴散法） CRO 30ug VEGF蛋白表達比色法定量檢測試劑盒

黃豆黃苷環(huán)沙星藥敏實驗紙片（擴散法） CIP 5ug VEGF蛋白表達流式儀檢測試劑盒
MODE-K 細胞乙酰輔酶A轉(zhuǎn)運蛋白1抗原(R型)人參皂苷Rh2Human

磷鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白抗原(S型)人參皂苷Rg3(標準品)Human

運動神經(jīng)元生存蛋白1抗原(S型)人參皂苷Rh2(標準品)Human, Mouse

磷化Smad2抗原(S型)原人參三Human, Mouse, Rat

Smad4抗原(±)-柚皮素(標準品)Human

Smad 7(多肽)1,2,3,4,6-O-沒食子酰葡萄糖(標準品)Human, Mouse

磷化SMAD(p-Ser425)抗原1,2-O-Dilinoleoyl-3-O-β-D-g...Human

突觸相關膜蛋白25抗原1,3-二咖啡酰奎寧(標準品)Human

Snail蛋白抗原1,7-雙苯-5-羥-6-庚烯-3-Human